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细菌蛋白提取试剂盒使用温和的非离子型去污剂，适用于大肠杆菌表达的重组蛋白提取。提取过程中不需进行超声破碎等复杂的操作步骤，有效避免了外源蛋白的污染。该试剂盒在抽提试剂的基础上添加了溶菌酶、DNaseⅠ和蛋白酶抑制剂PMSF，可提高蛋白提取效率并减轻因DNA引起的粘稠现象，有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物学活性，可进行IP、Western blot实验；提取体系中不含EDTA，可直接通过Ni-NTA等纯化填料进行蛋白纯化。该试剂盒既可适用于小量蛋白表达检测，也适用于大量蛋白的表达纯化试验。

• 8000rpm常温离心3min后，弃上清，尽量弃除残余培养基，留取管底部菌体。
  
• 100×PMSF(100mM)的配制：把一管PMSF晶体全部倒入到PMSF溶剂中，溶解混匀，即配制成100×PMSF，配成PMSF溶液后需-20℃保存。
  
• 即用型提取缓冲液的配制：每毫升提取缓冲液中加入10μL的100×PMSF，10μL溶菌酶，1μL DNase I，混匀后4℃贮存备用。该缓冲液现用现配，不建议贮存。
• 按照原菌液1/2～1/5体积加入即用型提取缓冲液，即2～5mL菌液收集的菌体加入1mL提取缓冲液，用吸头吹打至无可见细胞团块，重悬菌体。
  
• 20～37℃孵育15～20min，期间轻弹离心管数次以加速裂解。
  
  • 若蛋白表达量较低，建议结合超声破碎，置冰上后，采用300w，10s超声/10s间隔，超声20min，至菌液变清亮。
• 裂解完成后13000rpm 4℃离心5min，将上清（上清中即为可溶性蛋白）转移至新的离心管中，直接进行下一步纯化或检测实验。
  
• 蛋白提取物分装后建议-80℃保存。