产品货号:
RFT159
中文名称:
细菌蛋白提取试剂盒
英文名称:
Bacterial protein extraction kit
产品规格:
100次
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒使用温和的非离子型去污剂,适用于大肠杆菌表达的重组蛋白提取。提取过程中不需进行超声破碎等复杂的操作步骤,有效避免了外源蛋白的污染。该试剂盒在抽提试剂的基础上添加了溶菌酶、DNaseⅠ和蛋白酶抑制剂PMSF,可提高蛋白提取效率并减轻因DNA引起的粘稠现象,有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物学活性,可进行IP、Western blot实验;提取体系中不含EDTA,可直接通过Ni-NTA等纯化填料进行蛋白纯化。该试剂盒既可适用于小量蛋白表达检测,也适用于大量蛋白的表达纯化试验。每次提取使用1ml缓冲液计算,该试剂盒可以使用100次。
试剂盒组成:
使用方法:
相关搜索:细菌蛋白提取试剂盒,Bacterial protein extraction kit
试剂盒组成:
名称 | 规格 | 贮存 |
细菌蛋白提取缓冲液 | 100ml | 4℃ |
100mM PMSF(100×) | 10ml | RT(配制后-20℃) |
溶菌酶(50mg/ml) | 1ml | -20℃ |
DNase I(1000U/ml) | 100μl | -20℃ |
使用方法:
- 8,000rpm常温离心3min后,弃上清,尽量弃除残余培养基,留取管底部菌体。
- 即用型提取缓冲液配制:每ml提取缓冲液中加入10μl PMSF,10μl溶菌酶,1μl DNase I,混匀后4℃贮存备用。
注:该缓冲液现用现配,不建议贮存。 - 按照原菌液1/2-1/5体积加入即用型提取缓冲液,即2-5ml菌液收集的菌体加入1ml提取缓冲液,用吸头吹打至无可见细胞团块,重悬菌体。
- 20-37℃孵育15-20min,期间轻弹离心管数次以加速裂解。
注:若蛋白表达量较低,建议结合超声破碎,置冰上后,采用300w,10s超声/10s间隔,超声20min,至菌液变清亮。 - 裂解完成后13,000rpm4℃离心5min,将上清(上清中即为可溶性蛋白)转移至新的离心管中,直接进行下一步纯化或检测实验。
- 蛋白提取物分装后建议-80℃保存。
相关搜索:细菌蛋白提取试剂盒,Bacterial protein extraction kit